Uji ELISA workstation telah banyak digunakan secara klinis karena sensitivitas tinggi dan spesivitas yang baik. Namun, setiap tautan dalam operasi memiliki dampak yang lebih besar pada efek deteksi uji. Jika Anda tidak memperhatikan, itu dapat menyebabkan rendering warna tidak lengkap, pola dan hasil lainnya. Kami memadukan penyebab dan solusi dari masalah yang sering terjadi di setiap Tautan operasi sebagai berikut, berharap untuk memberikan beberapa inspirasi dan meningkatkan kualitas percobaan.
.. Pilihan reagen untuk ELISA otomatis sepenuhnya
Pilih reagen deteksi berkualitas tinggi untukELISA otomatis sepenuhnyaDan beroperasi secara ketat sesuai dengan petunjuknya. Sebelum operasi, menyeimbangkan pengecer pada suhu kamar selama 30-60 menit.
Ⅱ. Muatan sampel dari ELISA otomatis sepenuhnya
1. Alasan yang mungkin:
(1) jika pemisahan serum atau sampel plasma tidak baik, tambahkan sampel;
(2) dalam operasi manual, terlalu banyak pelat sampel akan menyebabkan terlalu lama waktu menunggu sebelum menempatkan sampel ke dalam inkubator (terutama ketika suhu dalam ruangan Tinggi);
(3) setelah menambahkan sampel dan menambahkan reagen enzim, cipratan enzim dari lubang.
2. Solusi:
(1) spesimen adalah serum: terbaik untuk menyimpan darah secara alami selama 1-2 jam, dan kemudian sentrifugal pada 3000 rpm selama 15 menit;
Plasma spesimen: tabung pengumpulan spesimen darah yang mengandung anti koagulasi harus digunakan, dan tabung pengambilan darah harus terbalik dan dicampur 5-10 Kali segera setelah pengambilan darah. Setelah periode waktu, sentrifugal pada 3000 rpm selama 15 menit;
Jika diuji dalam beberapa hari, dapat ditempatkan di kulkas pada 2-8 °C, dan jika disimpan, dapat ditempatkan di kulkas suhu rendah pada-20 °C.
(2) Masukkan sampel ke dalam inkubator tepat waktu setelah menambahkan sampel.
(3) setelah menambahkan reagen enzim, bersihkan permukaan pelat microtiter dengan kertas penyerap untuk dikeringkan.
(4) jika Di atau tambahan sampel otomatis lainnya digunakan, sebaiknya memilih FAME atau instrumen pemrosesan pasca lainnya untuk menambahkan reagen enzim.
(5) ketika ada banyak spesimen, silakan beroperasi dalam batch.
.. Inkubasi ELISA otomatis sepenuhnya
1. Alasan yang mungkin:
(1) tidak ada penutup atau penutup selama inkubasi, sehingga spesimen atau menipiskan dan menyerap ke dinding lubang, sehingga sulit untuk dibersihkan secara menyeluruh;
(2) waktu inkubasi secara drastis, menghasilkan pengikatan tidak spesifik di sekitar reaksi dengan baik, sehingga sulit untuk dibersihkan secara menyeluruh.
2. Solusi:
(1) pasang lembar penutup atau penutup;
(2) mengontrol waktu operasi secara ketat sesuai dengan petunjuk.
.. Piring cuci ELISA otomatis sepenuhnya
1. Alasan yang mungkin:
(1) cuci pelat secara manual, dan cairan melintasi di antara lubang-lubang;
(2) ketika pencuci pelat semi-otomatis digunakan untuk mencuci piring, jumlah cairan cuci tidak mencukupi, yang menyebabkan pencucian piring tidak ditemukan; penyumbatan jarum cuci pelat menyebabkan isapan tidak lengkap; Pencuci piring yang buruk menghasilkan efek pencucian pelat yang buruk;
(3) terlalu banyak pelat reaksi menyebabkan waktu tunggu yang lama untuk mencuci piring.
2. Solusi:
(1) pastikan bahwa Losion mengisi lubang dan jarum cuci tidak terhalang. Setelah mencuci piring, sebaiknya anda mengeringkan kertas secara lembut di bagian penyerap (pilih bersih, tidak ada atau lebih bahan penyerap berdebu);
(2) pengaturan yang cukup, atau gunakan pencuci pelat lainnya.
Ⅴ. Pengembangan warna dari ELISA otomatis sepenuhnya
1. Alasan yang mungkin:
(1) pengembang telah tersisa terlalu lama setelah persiapan atau menggunakan pengembang kedaluwarsa;
(2) ketika pengembang ditambahkan, maka akan memecahkan lubang dan menyebabkan cairan mengalir kembali.
2. Solusi:
(1) pengembang warna harus disiapkan sebelum menggunakan sebanyak mungkin, dan pengembang warna yang kedaluwarsa tidak dapat digunakan. Pengembang warna TMB biru muda tidak digunakan;
(2) menjaga pengembang tetap mengalir saat menambahkan sampel;
(3) cairan A dan B harus menghindari kontak dengan peralatan logam.
Ⅵ. Terminasi ELISA otomatis sepenuhnya
Kemungkinan Penyebab: misalnya, lebih banyak gelembung yang dihasilkan ketika solusi berhenti ditambahkan, yang menghasilkan peningkatan dalam posisi palsu. Karena itu, Hindari gelembung udara saat menambahkan solusi berhenti.
Ⅶ. Pelat membaca dari ELISA otomatis sepenuhnya
Jika bagian bawah pelat tidak bersih saat membaca pelat, pastikan pelat mikrotiter bersih. Oleh karena itu, dalam seluruh proses operasi, pastikan pelat ELISA tidak menghubungi asam hipoklorit, dan menyadari otomatisasi standar pengujian ELISA sepenuhnya otomatis sebanyak mungkin, yang secara efektif meningkatkan kualitas pengujian. Selain itu, penting untuk memilih ELISA yang memenuhi syaratPemasok workstation.
Dalam pengoperasian sebenarnya, selain memilih reagen yang baik, langkah-langkah operasi harus diikuti dengan ketat. Pada saat yang sama, kami harus melakukan dengan baik dalam kontrol kualitas dalam ruangan dan evaluasi kualitas eksternal, dan memeriksa setiap spesimen dengan gaya kerja yang ketat untuk memastikan kualitas inspeksi. Saat ini, cukup banyak unit di Tiongkok memiliki pembaca mikroplate otomatis sepenuhnya, yang telah memainkan peran penting dalam menyediakan pengujian standar ELISA otomatis sepenuhnya dan meningkatkan kualitas pengujian.